遺伝子クローニングの方法
a) ゲノムの塩基配列を決定するための clone-by-clone 法。
- まず，各染色体の遺伝子地図ならびに物理的地図を作製するために，制限酵素で切断し，いろいろなゲノムライブラリーを準備する。
- クローン DNA の重なり合った部分を利用して，各クローン DNA の順番を決定していく。
- クローン DNA の配列が決定されると，ゲノム全体の配列が組み立てられる。
b) ショットガン法。
- 制限酵素で切断し，いろいろなゲノムライブラリーを準備する。
- 任意に選択して，配列を決定する。
- コンピュータによってその配列を組み立てていく。
《米》国立保健研究所 National Institute of Health と《米》エネルギー省 Department of Energy によって主導されたヒトゲノムプロジェクトでは，ゲノムの塩基配列を決定するために clone-by-clone 法が用いられた。また，バイオ企業セレラで実施されたゲノムプロジェクトでは，ショットガン法が用いられた。
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February 05, 2020